肿瘤靶向120基因检测及PDL122C3表达检测套餐（组织）

指南共识与临床必要性：根据最新的NCCN（美国国家综合癌症网络）及CSCO（中国临床肿瘤学会）指南，对实体瘤患者进行全面的基因检测已成为标准诊疗路径的重要组成部分。指南明确推荐，对于晚期或转移性实体瘤患者，应尽可能进行多基因检测，以寻找潜在的靶向治疗机会、评估免疫治疗疗效（如PD-L1表达状态）、预测化疗敏感性及评估遗传风险。这不仅是实现“精准医疗”的核心，也是为患者制定个体化、最优化治疗方案的关键循证依据。

产品概述：本检测套餐整合了基于下一代测序（NGS）技术的“肿瘤靶向120基因检测”与免疫组化（IHC）技术的“PD-L1（22C3抗体）表达检测”。它能够从DNA水平系统分析肿瘤相关的驱动基因突变、拷贝数变异、基因融合以及微卫星不稳定性（MSI）和同源重组修复（HRR）状态，同时从蛋白水平评估PD-L1的表达水平，为临床提供一站式的分子分型与治疗决策支持。

中国肿瘤流行病学现状（基于国家癌症中心最新数据）：恶性肿瘤是严重威胁我国居民健康的重大公共卫生问题。总体而言，中国恶性肿瘤年新发病例数约数百万，发病率和死亡率呈持续上升趋势。恶性肿瘤年龄标化发病率与死亡率均高于世界平均水平。从癌谱分布看，肺癌、结直肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌等仍是主要的恶性肿瘤类型。不同癌种的5年生存率存在差异，整体5年生存率在过去十年间虽有显著提升，但仍与发达国家存在差距，凸显了早诊早治和精准治疗的重要性。高发年龄普遍在40岁以上，并随年龄增长而增加，发病的男女比例因癌种而异，例如肺癌男性显著高于女性，而甲状腺癌则女性高发。这些数据深刻说明了在我国开展规范、精准的肿瘤基因检测，以改善治疗结局和生存率的紧迫性与重大价值。

本套餐检测内容全面，涵盖靶向、免疫、化疗及遗传风险评估等多个维度，具体核心模块如下：

证据等级说明：报告中提供的用药建议将依据循证医学证据等级进行标注，包括：

• 1级证据：国内外权威指南（如NCCN、CSCO）明确推荐，或该基因-药物匹配在对应癌种中已获国家药品监督管理局批准。
• 2级证据：在其它癌种中获批，或在本癌种中有高水平临床研究数据支持（如大型II/III期临床试验）。
• 3级证据：临床前研究或个案报告提示潜在疗效，可作为标准治疗失败后的探索方向或临床试验入组依据。

本检测采用国际认可的NGS技术与标准化IHC流程，确保结果的准确性与可靠性。

NGS湿实验流程：

• 样本处理与DNA提取：从福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织、新鲜组织或穿刺活检组织中提取肿瘤基因组DNA，并进行质控（评估DNA浓度、片段长度及纯度）。
• 文库构建：将提取的DNA进行片段化、末端修复、加接头，构建出可供测序的DNA文库。
• 目标区域捕获与富集：使用特异性探针对120个目标基因的外显子及部分内含子区域进行杂交捕获，富集目标序列，去除无关基因组背景。
• 高通量测序：将富集后的文库在高通量测序仪上进行双端测序，产生海量的序列读数（Reads），确保每个目标区域达到足够的测序深度（通常>500X），以有效检出低频突变。

生物信息学分析：

• 数据质控与比对：对原始测序数据进行质量过滤，并将高质量的序列与人类参考基因组进行比对定位。
• 变异检测与注释：通过专业算法识别单核苷酸变异（SNV）、小片段插入缺失（InDel）、拷贝数变异（CNV）和基因融合（Fusion）。所有变异均与国际权威数据库（如COSMIC, ClinVar, OncoKB等）进行比对和注释。
• MSI与TMB分析：通过分析特定微卫星位点的序列不稳定性判断MSI状态；通过计算每百万碱基中的突变总数评估TMB。

PD-L1免疫组化检测：采用经FDA批准的22C3抗体克隆，在自动化染色平台对组织切片进行染色，由资深病理医师根据TPS（肿瘤细胞阳性比例分数）和/或CPS（联合阳性分数）标准进行判读评分。

本检测适用于以下临床场景的实体瘤患者：

• 初诊晚期/转移性患者的分型与一线治疗指导：尤其是非小细胞肺癌、结直肠癌、胃癌、肝胆胰肿瘤、乳腺癌、前列腺癌等常见癌种，以及所有病理类型不明确或罕见肿瘤，用于寻找一线靶向或免疫治疗机会。
• 既往治疗耐药后的换药指导：对于既往靶向治疗或化疗后出现疾病进展的患者，检测有助于发现获得性耐药机制（如EGFR T790M, MET扩增等），指导后续靶向药物选择。
• 术后辅助治疗决策与预后评估：对于已接受根治性手术的早中期患者（如II-III期结直肠癌、肺癌），检测可提供预后信息，并评估是否可从辅助靶向或免疫治疗中获益。
• 遗传风险评估：对于有个人或家族肿瘤史（如早发、多发、罕见肿瘤）的患者，通过HRR基因检测评估是否存在胚系突变，以指导家族遗传风险管理及预防性措施。
• 潜在筛查与早期发现：结合液体活检技术，可用于高危人群的筛查及治疗后微小残留病灶（MRD）监测，但需在临床医生指导下审慎应用。

为确保检测流程规范、样本合格、结果准确，需遵循以下步骤：

• 第一步：临床医嘱与申请：临床医师根据患者病情评估检测必要性，开具检测医嘱，并完整填写检测申请单，包括患者基本信息、临床诊断、样本信息及检测需求。
• 第二步：样本采集与处理：由病理科或临床科室按规范采集组织样本（石蜡切片、石蜡块、新鲜组织或穿刺组织）。组织样本需经病理医师评估，确认肿瘤细胞含量满足检测要求（通常>20%）。
• 第三步：样本寄送与登记：将合格的样本、病理报告复印件及申请单一同寄送至检测实验室。实验室接收样本后进行唯一编号登记，并核查样本信息。
• 第四步：实验室检测与分析：实验室按照前述技术原理，严格执行标准操作程序（SOP）进行实验操作、测序和生物信息学分析，并进行内部质控。
• 第五步：报告生成与发放：检测结果由分子病理医师和生物信息专家共同审核，生成图文并茂的数字化检测报告。报告周期通常为自实验室收到合格样本起10个工作日。报告将通过安全途径发送至申请医师。

精准医疗不仅在于治疗，也贯穿于治疗后的全程管理。

术后随访监测：对于根治性治疗后的患者，定期的临床随访和影像学检查至关重要。随访频率根据癌种和分期而定，通常术后前2-3年每3-6个月一次，之后逐渐延长间隔。随访内容包括体格检查、肿瘤标志物检测及CT/MRI/PET-CT等影像学评估。

ctDNA动态监测与MRD评估：基于血液的循环肿瘤DNA（ctDNA）检测为肿瘤监测提供了新的工具。

• 疗效监测：治疗期间动态监测ctDNA水平变化，可早于影像学数周至数月提示治疗有效或疾病进展。
• 微小残留病灶（MRD）评估：根治性治疗后（如手术或放化疗后），检测血液中是否存有来源于肿瘤的ctDNA，可用于评估MRD状态。MRD阳性提示复发风险极高，可能需要更密集的随访或考虑强化辅助治疗；MRD阴性则提示预后较好。MRD评估是当前肿瘤治疗领域的前沿热点。
• 耐药机制早发现：在靶向治疗过程中，定期ctDNA监测可及时发现新的基因突变，提示耐药克隆的出现，为提前更换治疗方案提供依据。

一份专业的分子检测报告是连接检测结果与临床决策的桥梁。本报告将清晰呈现以下核心信息：

• 突变结果分类：将检出的基因变异分为以下几类：
  • 致病/可能致病突变：具有明确临床意义的驱动突变，与靶向治疗、预后或遗传风险直接相关。
  • 意义未明突变（VUS）：目前证据不足以判断其临床意义，需谨慎解读，通常不建议作为治疗决策的唯一依据。
  • 可能良性/良性突变：多与肿瘤发生发展无关。
• 靶向及免疫用药建议：基于检测到的突变和生物标志物（如MSI-H, PD-L1高表达），列出可能获益的靶向药物和免疫检查点抑制剂，并明确标注药物适应症、证据等级（1-3级）及是否已在国内获批。
• 化疗药物提示：对化疗相关基因（如DPYD, UGT1A1）的变异进行解读，提示相关药物（如卡培他滨、伊立替康）的疗效或毒性风险。
• 遗传咨询建议：若检测到HRR通路等可能为胚系来源的致病突变，报告会明确提示，并建议患者进行遗传咨询及考虑家系验证。
• 临床试验匹配：报告可能列出与患者突变谱相匹配的正在招募的国内临床试验信息，为常规治疗失败的患者提供新的治疗选择机会。

最终决策：报告中的所有结论和建议均需由主管临床医师结合患者的具体病情、体能状态、治疗史、药物可及性及经济因素等进行综合判断后，制定最终的个体化治疗方案。分子检测结果是重要的决策依据，但不能替代临床医生的全面评估。