γ-干扰素释放试验（QFT）

1. 项目介绍：从临床困境到精准诊断的突破

汉中市留坝县γ-干扰素释放试验（QFT）预约选留坝县万核医学基因检测咨询中心提供专业的γ-干扰素释放试验（QFT）检测服务。预约电话：400-178-9498

清晨的ICU病房，交班医生正在汇报一位因重症肺炎、呼吸衰竭入院的老年患者情况。尽管已使用广谱抗生素，患者仍持续高热，肺部影像学提示浸润影快速进展。感染科主任在查房后指出：“社区获得性肺炎病原体复杂，传统微生物培养周期长、阳性率低，尤其在免疫抑制或前期抗菌药物暴露的情况下，极易延误诊治。我们需要更快速、更精准的病原学证据。” 随即，医嘱下达：送检γ-干扰素释放试验（QFT）以辅助排查结核分枝杆菌等特殊病原体感染。

这一场景折射出我国感染性疾病诊疗面临的普遍挑战。中国是结核病负担大国，患者数量位居全球第三。而在重症感染领域，ICU院内感染率高达15%-30%，脓毒症死亡率居高不下，社区获得性肺炎发病率持续处于较高水平，加之耐药菌检出率的逐年增长，共同构成了严峻的公共卫生形势。传统的病原检测方法，如涂片镜检和培养，对于结核分枝杆菌这类生长缓慢、苛养的病原体，存在灵敏度低、耗时漫长（数周）的显著局限，常导致诊断延迟和治疗盲目。

γ-干扰素释放试验（QFT）正是在此背景下应运而生的免疫学检测技术。它通过检测全血样本中结核分枝杆菌特异性抗原刺激后T细胞释放的γ-干扰素水平，来判断是否存在结核杆菌感染。该方法无需活菌，直接检测宿主免疫反应，巧妙绕过了传统培养的瓶颈，将报告周期大幅缩短至约6个工作日，为临床，尤其是结核病疑似病例的快速辅助诊断、潜伏感染筛查及鉴别诊断提供了有力工具。

2. 检测内容与性能指标

γ-干扰素释放试验（QFT）核心聚焦于结核分枝杆菌复合群感染的特异性免疫应答检测。下表概括了其关键检测内容与性能特征：

技术优势：与结核菌素皮肤试验（TST）相比，QFT不受卡介苗接种史和大多数非结核分枝杆菌感染的影响，特异度更高。其采用全血体外刺激，操作标准化，结果客观，不受主观判断影响。

重要提示：QFT检测的是免疫反应状态，而非直接检测病原体核酸或活菌。因此，其阳性结果提示存在结核分枝杆菌特异性T细胞免疫应答，需结合临床表现、影像学及其他微生物学检查综合判断为活动性结核病或潜伏感染。阴性结果不能完全排除活动性结核病，尤其在免疫低下人群（如HIV感染者、严重营养不良、使用免疫抑制剂者）中可能出现假阴性。

3. 技术原理与流程

γ-干扰素释放试验（QFT）基于细胞免疫学原理，其核心流程如下：

• 样本采集与刺激：采集患者肝素抗凝全血，并立即分装至含不同刺激物的试管中。通常包括：① 结核特异性抗原管（含ESAT-6和CFP-10等结核分枝杆菌复合群特异性抗原）；② 阳性对照管（含植物血凝素PHA，用于监测淋巴细胞反应能力）；③ 阴性对照管（仅含培养基）。
• 体外孵育：将各管血液样本在37℃条件下孵育16至24小时。在此期间，若患者体内存在针对结核分枝杆菌抗原致敏的T淋巴细胞，则会在抗原刺激下活化并释放γ-干扰素。
• 血浆分离与检测：孵育结束后，离心分离血浆。采用酶联免疫法（ELISA）定量检测各管血浆中γ-干扰素的浓度。
• 结果计算与判读：通过计算结核抗原管与阴性对照管的IFN-γ差值（IU/mL），并与预设的阈值进行比较，结合阳性对照反应情况，得出阳性、阴性或不确定的结果。

整个过程在实验室标准化条件下完成，避免了体内试验的变数，确保了检测的重复性和可靠性。

4. 适用人群

γ-干扰素释放试验（QFT）主要适用于以下临床情况的人群：

• 活动性结核病疑似患者：尤其适用于痰涂片阴性、培养周期等待中、或肺外结核（如结核性胸膜炎、脑膜炎、淋巴结炎、骨关节结核等）的辅助诊断。
• 潜伏性结核感染（LTBI）筛查：对结核病高危人群进行筛查，如与活动性肺结核患者密切接触者、HIV感染者、准备接受肿瘤坏死因子抑制剂等免疫抑制治疗的患者、血液透析患者、器官移植受者等。
• 免疫状态评估需求的患者：需要鉴别诊断结节病、克罗恩病等与结核病有相似临床表现的疾病时。
• 特殊人群结核感染评估：来自结核病高负担地区的移民、医务人员等职业高风险人群的定期筛查。
• 治疗效果监测参考：部分研究探讨其作为治疗反应动态监测指标的潜在价值，但目前并非常规推荐用途。

注意：对于重症感染、脓毒症休克、极度免疫缺陷患者，由于淋巴细胞功能可能严重受损，可能导致QFT假阴性结果或结果不确定，解读需格外谨慎。

5. 样本采集与送检规范

规范的样本采集与运输是保证QFT检测结果准确性的前提。

• 样本类型：专用肝素抗凝管采集的静脉全血。
• 采集要求：
  • 严格无菌操作。
  • 采集后立即轻柔颠倒混匀5-10次，使抗凝剂与血液充分混合，防止凝固。
  • 避免溶血、脂血或血量不足。
• 样本处理与运输：
  • 理想情况：采血后应立即（8小时内）将全血分装至预置刺激物的QFT专用试管中，并开始孵育。
  • 运输条件：若不能在采血点立即分装孵育，未分装的全血样本应在室温（15-25℃）下保存和运输，切勿冷藏或冷冻，以免影响淋巴细胞活性。运输过程需避免剧烈震荡和极端温度。
  • 保存时限：全血样本在采集后至分装刺激前的室温保存时间应尽可能短，最长不超过16小时，以保证淋巴细胞的最佳反应性。

6. 临床意义与监测价值

QFT在抗感染诊疗中的价值主要体现在诊断与筛查阶段：

• 辅助快速诊断：在活动性结核病诊断中，尤其是涂阴和肺外结核，QFT可提供重要的实验室证据，缩短诊断延迟，帮助临床尽早启动针对性抗结核治疗。
• 潜伏感染筛查与干预：通过筛查发现LTBI者，可对其进行预防性治疗，从而有效降低未来发展为活动性结核病的风险，这对于控制结核病传播、尤其是在高危人群中具有重要意义。
• 鉴别诊断：在影像学表现为肺部阴影或淋巴结肿大等情况下，QFT有助于区分结核感染与其他疾病（如恶性肿瘤、非结核分枝杆菌病、真菌感染等）。

关于复检与监测：目前不推荐常规使用QFT动态监测活动性结核病的治疗疗效，因为即使治疗成功，特异性T细胞免疫反应也可能持续存在较长时间，导致结果持续阳性。对于LTBI者接受预防性治疗后是否需复检QFT，尚无统一标准，应依据临床指南和个体情况决定。

7. 报告解读要点

解读QFT报告时，必须结合临床背景进行综合判断：

• 阳性结果：表示受检者体内存在针对结核分枝杆菌抗原的特异性T细胞免疫应答。提示：
  • 可能存在活动性结核病（需结合症状、体征、影像学、微生物学结果确诊）。
  • 可能存在潜伏性结核感染（LTBI）（患者无活动性结核病的临床表现和证据）。
  • 既往患过结核病已治愈，部分人可能仍持续阳性。
  临床需积极寻找活动性结核病的证据，并对LTBI者评估预防性治疗的必要性。
• 阴性结果：表示未检测到显著的结核特异性免疫反应。提示：
  • 当前无结核分枝杆菌感染（可能性大）。
  • 但不能完全排除活动性结核病，特别是在病程极早期（感染后窗口期）、严重免疫抑制状态、淋巴细胞数量或功能严重低下的患者中。
• 不确定结果：通常是由于阴性对照值过高或阳性对照反应不足所致。可能原因包括：
  • 样本采集、运输或处理不当。
  • 患者存在广泛的免疫抑制或淋巴细胞功能衰竭（如晚期HIV感染、脓毒症、使用强效免疫抑制剂）。
  出现不确定结果时，应评估患者免疫状态，并在临床允许时考虑重复检测。

核心原则：QFT是重要的辅助诊断工具，而非确诊的唯一依据。活动性结核病的诊断始终需要临床、影像、微生物（包括病原学培养或分子检测）的综合证据链。在ICU等重症感染复杂场景中，QFT作为结核感染筛查和辅助诊断的一部分，与病原宏基因组测序等直接检测技术可互为补充，共同构建更完整的病原学诊断体系，以应对耐药菌增长和复杂感染带来的挑战。

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