热门
结核分枝杆菌及利福平耐药基因检测
驻马店市平舆县结核分枝杆菌及利福平耐药基因检测预约选平舆县万核医学基因检测咨询中心，地址：河南省驻马店市平舆县张楼办事处中兴路188号（如需办理，需提前预约），热线4001789498。快速鉴定病原体，指导精准抗感染治疗。
预约价 ¥736
¥957
省¥221
✓ 官方授权
✓ 报告权威
✓ 隐私保护
✓ 售后保障
项目详情
价格套餐
预约须知
检测项目详情
1. 项目介绍
临床案例：患者张XX，男，58岁，因"反复发热2月伴咳嗽"入院，先后使用β-内酰胺类、喹诺酮类抗生素治疗效果不佳。胸部CT提示双肺多发结节伴空洞形成，痰涂片抗酸染色3次阴性。面临诊断困境时，临床送检了结核分枝杆菌及利福平耐药基因检测，48小时内即确认痰标本中存在结核分枝杆菌复合群DNA，同时检测出rpoB基因突变提示利福平耐药。
我国作为结核病高负担国家，最新流行病学数据显示：活动性肺结核患者数居全球第三位，ICU院内感染中分枝杆菌检出率达15-30%，耐多药结核病比例呈上升趋势。传统的抗酸染色和培养方法存在明显局限：
- 涂片灵敏度不足（30-40%），培养周期长达2-8周
- 无法区分结核分枝杆菌复合群与非结核分枝杆菌
- 表型药敏试验滞后临床决策2-4周
本检测采用实时荧光PCR技术实现三大突破：
- 6小时内完成病原体鉴定与耐药基因检测
- 对涂阴标本的检出率提升40-50%
- 特异性引物设计避免环境分枝杆菌交叉反应
2. 检测内容
| 检测指标 | 技术参数 |
|---|---|
| 靶病原体 | 结核分枝杆菌复合群（含MTB、BCG等） |
| 检测基因 | IS6110插入序列、16S rRNA基因 |
| 耐药检测 | rpoB基因核心区域（codon 426-452） |
| 灵敏度 | ≥50 copies/ml（痰液标本） |
| 特异度 | ＞98%（与培养及测序结果比较） |
3. 技术原理
检测流程严格遵循ISO 15189标准：
- 样本处理：痰液采用N-乙酰-L-半胱氨酸-氢氧化钠消化，体液标本经离心浓缩
- 核酸提取：磁珠法提取DNA，内置人源基因对照监测提取效率
- 扩增体系：多重荧光PCR同时检测保守序列和耐药突变
- 质控标准：每批次包含阴性对照、阳性对照和抑制物对照
检测采用TaqMan-MGB双探针技术，针对rpoB基因设计野生型与突变型特异性探针，通过熔解曲线分析区分81bp利福平耐药决定区的主要突变型（如S450L、H445Y等）。
4. 适用人群
以下七类患者应优先考虑检测：
- ICU重症感染合并ARDS或多脏器功能衰竭
- 不明原因发热＞2周伴肺外表现（淋巴结肿大、浆膜腔积液）
- HIV感染者CD4<200 cells/μl合并肺部浸润影
- 抗结核治疗4周后临床症状无改善
- 特殊部位感染（结核性脑膜炎、骨关节结核）
- 化疗/移植后出现非典型肺部病变
- 密切接触耐多药结核患者的筛查
5. 样本采集与送检
采集标准：
| 标本类型 | 最低体积 | 保存条件 |
|---|---|---|
| 晨痰 | 3-5ml | 4℃保存≤72h |
| 肺泡灌洗液 | 10ml | 立即送检 |
| 脑脊液 | 2ml | -70℃冻存（避免反复冻融） |
| 胸腹水 | 20ml | 无菌管常温运输 |
- 痰标本应在抗生素使用前采集
- 血性标本需增加核酸提取纯化步骤
- 冷冻标本需完全融化后混匀检测
6. 抗感染监测
检测结果应结合临床进行动态评估：
- 治疗2周后：可复查痰标本DNA载量变化评估早期疗效
- 持续阳性＞4周：提示可能存在依从性差或未检出耐药
- 新发耐药风险：既往利福平单药治疗史患者需每月监测rpoB突变
7. 报告解读
结果判读标准：
- 阳性阈值：IS6110 Ct值≤38且扩增曲线符合判定标准
- 混合感染：当野生型和突变型探针信号差值＞3个Ct值时提示异质性耐药
- 临床意义：rpoB基因突变通常对应利福平MIC≥1μg/ml，需调整含利福平方案
本检测已通过国家临检中心组织的室间质评，在肺外结核诊断中显示出重要价值：脑脊液阳性率较培养提高35%，尿液标本对泌尿系统结核的诊断符合率达89%。随着耐药结核疫情的严峻形势，早期快速诊断对阻断传播链具有重大公共卫生意义。